基因敲除小鼠作为研究基因功能重要工具,应用十分广泛,然而实际操作中大家常常遇到这样问题:

小鼠之友:

雪白毛球:靶基因敲除造成小鼠胚胎致死无法生育。

实验室我最大:研究靶基因在某一阶段或者某一个组织的表达情况,全敲小鼠并不能满足我们的研究要求。

条件性基因敲除小鼠(CKO)就应运而生了,完美地解决了上面2个棘手问题。

条件性敲除小鼠

条件性敲除小鼠(Conditionalknockoutmice,CKO)使靶基因缺失仅发生于小鼠生命周期的某一阶段或某一特定的组织,而在其它组织或细胞表达正常,从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。

?全敲和条件性敲除的对比:

×常规基因敲除的局限性

√条件性基因敲除的优点

?胚胎致死

?防止胚胎致死

?所有细胞都改变

?特定组织

?功能代偿与冗余

?特定时期

技术原理

通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP或Flp-FRT来实现的。在待敲除目的基因一个或多个重要外显子两端各放置一个LoxP(或FRT)序列,得到flox(FlankedbyLoxP)小鼠。将flox小鼠与带有组织特异性表达的Cre(或Flp)的小鼠交配繁殖,以获得在特定组织里把目标基因敲除掉的小鼠,即条件性基因敲除小鼠。

应用

1.用于具有胚胎致死性目的基因的研究:如Kras基因具有胚胎致死性,以该基因敲除作癌症相关研究就需要构建条件性基因敲除鼠。

2.用于研究基因在特定的组织的生理病理功能:同一个基因在不同组织的功能并不完全一样,CKO模型可以更准确地研究某个基因在某种组织的作用。

3.与控制Cre表达的其它诱导系统相结合,还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。

条件敲除小鼠与常规基因敲除小鼠相比,过程更加复杂,周期也会更长,一般获得F0代需要4~6个月,F1代6~8个月。但是它解决了基因胚胎致死难题,还可以实现基因在特异组织或者特定时间的表达,是精准研究靶基因功能重要工具。邦耀生物的新一代条件敲除技术可以真正解决这些难题,心急的学霸直接拉到底部「阅读原文」







































治白癜风秘方
哪里治疗白癜风好



转载请注明地址:http://www.qianrih.com/qjzbm/1319.html